Penetapan Kadar Karbohidrat

LAPORAN LENGKAP

Nama                             : Irene Pratami Raratunasah Naddu

Kelas/NIS                      : 3.C / 114675

Kelompok                      : C.2.1

Judul Penetapan              : Penetapan Kadar Karbohidrat 

Tanggal Mulai                 : 23 September 2013

Tanggal Selesai               : 25 September 2013

Dasar Prinsip                  : Prinsip kerja cara ini adalah hidrolisis pati oleh asam menjadi

                                        gula pereduksi. Pada penetapan cara Luff, dipakai pereduksi garam Cu

                                        kompleks, dimana glukosa yang bersifat pereduksi akan mereduksi

                                        Cu2+ menjadi Cu+ atau CuO direduksi menjadi Cu2O yang berwarna

                                        merah bata. Kemudian kelebihan CuO ditetapkan dengam cara iodometri.

                                       Dengan menetapkan blanko, maka volume (ml) tio yang dibutuhkan

                                       untuk menitar kelebihan Cu2+ dapat diketahui. Selisih volume tio

                                       blanko-sample setara dengam jumlah mg glukosa yang terdapat dalam

                                        sampel.

Tujuan Penetapan           : Untuk mengetahui kadar karbohidrat suatu sampel.

Reaksi                            : (C6H10O5)n + nH2O                 nC6H12O6

                                         C6H12O6 + 2CuO                    Cu2O + C5H11O5 + COOH

                                    sisa CuO + 2KI + H2SO4               CuI2 + K2SO4 + H2O

                                           CuI2                                       Cu2I2 + I2

                                          I2 + Na2S2O3                         2NaI + Na2S4O6

Landasan Teori               :

                           Gula reduksi adalah gula yang mempunyai kemampuan untuk mereduksi. Hal ini dikarenakan adanya gugus aldehid atau keton bebas. Senyawa-senyawa yang mengoksidasi atau bersifat reduktor adalah logam-logam oksidator seperti Cu (II). Contoh gula yang termasuk gula reduksi adalah glukosa, manosa, fruktosa, laktosa, maltosa, dan lain-lain. monosakarida yang mempunyai kemampuan untuk mereduksi suatu senyawa. Sifat pereduksi dari suatu gula ditentukan oleh ada tidaknya gugus hidroksil bebas yang reaktif. Prinsip analisanya berdasarkan pada monosakarida yang memiliki kemampuan untuk mereduksi suatu senyawa. Adanya polimerisasi monosakarida mempengaruhi sifat mereduksinya.

Pada praktikum kali ini dilakukan penetapan karboohidrat melalui penetapan kadar gula reduksi dengan metode Penentuan gula reduksi dengan metode Luff-Schoorl ditentukan bukan kuprooksidanya yang mengendap tetapi dengan menentukan kuprooksida dalam larutan sebelum direaksikan dengan gula reduksi sesudah reaksi dengan sample gula reduksi yang dititrasi dengan Na-Thiosulfat. Selisihnya merupaka kadar gula reduksi. Reaksi yang terjadi selama penentuan karbohidrat dengan cara Luff-Schoorl adalah mula-mula kuprooksida yang ada dalam reagen akan membebaskan Iod dari garam KI. Banyaknya iod dapat diketahui dengan titrasi menggunakan Na-Thiosulfat. Untuk mengetahui bahwa titrasi sudah cukup maka diperlukan indicator amilum. Apabila larutan berubah warna dari biru menjadi putih berarti titrasi sudah selesai. Selisih banyaknya titrasi blanko dan sample dan setelah disesuaikan dengan tabel yang menggambarkan hubungan banyaknya Na-Thiosulfat dengan banyaknya gula reduksi (Khopkar, 1999).

             Karbohidrat dapat digolongan menjadi dua macam yaitu karbohidrat sederhana dengan karbohidrat kompleks atau dapat pula menjadi tiga macam, yaitu monosakarida, disakarida, dan polisakarida. Gula adalah suatu karbohidrat sederhana yang menjadi sumber energi dan merupakan oligosakarida, polimer. Monosakarida akan mereduksikan CuO dalam larutan Luff menjadi Cu2O. Kelebihan CuO akan direduksikan dengan KI berlebih, sehingga dilepaskan I2. I2 yang dibebaskan tersebut dititrasi dengan larutan Na2S2O3.

             

          Pada dasarnya prinsip metode analisa yang digunakan adalah Iodometri karena kita akan menganalisa I2 yang bebas untuk dijadikan dasar penetapan kadar. Dimana proses iodometri adalah proses titrasi terhadap iodium (I2) bebas dalam larutan. Apabila terdapat zat oksidator kuat (misal H2SO4) dalam larutannya yang bersifat netral atau sedikit asam penambahan ion iodida berlebih akan membuat zat oksidator tersebut tereduksi dan membebaskan I2 yang setara jumlahnya dengan dengan banyaknya oksidator (Rivai, 2005).

           Metode Luff Schoorl ini baik digunakan untuk menentukan kadar karbohidrat yang berukuran sedang. Dalam penelitian M.Verhaart dinyatakan bahwa metode Luff Schoorl merupakan metode tebaik untuk mengukur kadar karbohidrat dengan tingkat kesalahan sebesar 10%. Pada metode Luff Schoorl terdapat dua cara pengukuran yaitu dengan penentuan Cu tereduksi dengan I2 dan menggunakan prosedur Lae-Eynon.

               

                Inversi sukrosa menghasilkan gula invert atau gula reduksi (glukosa dan fruktosa). Gula invert akan mengkatalisis proses inversi sehingga kehilangan gula akan berjalan dengan cepat. Menurut Parker (1987) dkk. Dalam kuswurj (2008) laju inersi sukrosa akan semakin besar pada kondisi pH rendah dan temperatur tinggi dan berkurang pada pH tinggi (pH 7) dan temperatur rendah. Laju inversi yang paling cepat adalah pada kondisi pH asam (pH 5).

           Penentuan kadar glukosa dilakukan dengan cara menganalisis sampel melalui pendekatan proksimat. Terdapat beberapa jenis metode yang dapat dilakukan untuk menentukan kadar gula dalam suatu sampel. Salah satu metode yang paling mudah pelaksanaannya dan tidak memerlukan biaya mahal adalah metode Luff Schoorl. Metode Luff Schoorl merupakan metode yang digunakan untuk menentukan kandungan gula dalam sampel.

Metode ini didasarkan pada pengurangan ion tembaga (II) di media alkaline oleh gula dan kemudian kembali menjadi sisa tembaga. Ion tembaga (II) yang diperoleh dari tembaga (II) sulfat dengan sodium karbonat di sisa alkaline pH 9,3-9,4 dapat ditetapkan dengan metode ini. Pembentukan (II)-hidroksin dalam alkaline dimaksudkan untuk menghindari asam sitrun dengan penambahan kompleksierungsmittel. Hasilnya, ion tembaga (II) akan larut menjadi tembaga (I) iodide berkurang dan juga oksidasi iod menjadi yodium. Hasil akhirnya didapatkan yodium dari hasil titrasi dengan sodium hidroksida (Rivai, 2005).

Gula pereduksi yaitu monosakarida dan disakarida kecuali sukrosa dapat ditunjukkan dengan pereaksi Fehling atau Benedict menghasilkan endapan merah bata (Cu2O). selain pereaksi Benedict dan Fehling, gula pereduksi juga bereaksi positif dengan pereaksi Tollens (Apriyanto et al 1989). Penentuan gula pereduksi selama ini dilakukan dengan metode pengukuran konvensional seperti metode osmometri, polarimetri, dan refraktrometri maupun berdasarkan reaksi gugus fungsional dari senyawa sakarida tersebut (seperti metode Luff-Schoorl, Seliwanoff, Nelson-Somogyi dan lain-lain).
Hasil analisisnya adalah kadar gula pereduksi total dan tidak dapat menentukan gula pereduksi secara individual. Untuk menganalisis kadar masing-masing dari gula pereduksi penyusun madu dapat dilakukan dengan menggunakan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCTK). Metode ini mempunyai beberapa keuntungan antara lain dapat digunakan pada senyawa dengan bobot molekul besar dan dapat dipakai untuk senyawa yang tidak tahan panas.

Pengukuran karbohidrat yang merupakan gula pereduksi dengan metode Luff Schoorl ini didasarkan pada reaksi antara monosakarida dengan larutan cupper. Monosakarida akan mereduksikan CuO dalam larutan Luff menjadi Cu2O. Kelebihan CuO akan direduksikan dengan KI berlebih, sehingga dilepaskan I2. I2 yang dibebaskan tersebut dititrasi dengan larutan Na2S2O3. Pada dasarnya prinsip metode analisa yang digunakan adalah Iodometri karena kita akan menganalisa I2 yang bebas untuk dijadikan dasar penetapan kadar. Dimana proses iodometri adalah proses titrasi terhadap iodium (I2) bebas dalam larutan. Apabila terdapat zat oksidator kuat (misal H2SO4) dalam larutannya yang bersifat netral atau sedikit asam penambahan ion iodida berlebih akan membuat zat oksidator tersebut tereduksi dan membebaskan I2 yang setara jumlahnya dengan dengan banyaknya oksidator (Underwood, 1996).
Monosakarida akan mereduksikan CuO dalam larutan Luff menjadi Cu₂O. Kelebihan CuO akan direduksikan dengan KI berlebih, sehingga dilepaskan I₂. I₂ yang dibebaskan tersebut dititrasi dengan larutan Na₂S₂O₃. Pada dasarnya prinsip metode analisa yang digunakan adalah Iodometri karena kita akan menganalisa I₂ yang bebas untuk dijadikan dasar penetapan kadar. Dimana proses iodometri adalah proses titrasi terhadap iodium (I₂) bebas dalam larutan.

Apabila terdapat zat oksidator kuat (misal H₂SO₄) dalam larutannya yang bersifat netral atau sedikit asam penambahan ion iodida berlebih akan membuat zat oksidator tersebut tereduksi dan membebaskan I₂ yang setara jumlahnya dengan dengan banyaknya oksidator. I₂ bebas ini selanjutnya akan dititrasi dengan larutan standar Na₂S₂O₃ sehinga I₂akan membentuk kompleks iod-amilum yang tidak larut dalam air. Oleh karena itu, jika dalam suatu titrasi membutuhkan indikator amilum, maka penambahan amilum sebelum titik ekivalen.
Gugus hidroksil yang relative pada glukosa terletak pada C-1 sedangkan fruktosa pada C-2. Sakarosa tidak mempunyai gugus –OH bebas yang relative,karena keduanya saling terikat, sedangkan laktosa mempunyai OH bebas atom C-1 pada gugus glukosanya, sehingga laktosa bersifat pereduksi sedangkan sakarosa nonpereduksi. Inversi sakarosa terjadi dalm suasana asam,gula inverse ini tidak dapat berbentuk Kristal karena kelarutan fruktosa dan glukosa  (Poedjiadi, 2007).

Alat                                : - Erlenmeyer

                                        - Pipet volum 25 ml

                                        - Pendingin tegak

                                        - Hot plate

                                        - Labu ukur 250 ml

                                        - Pipet tetes

                                        - Kertas saring

                                        - Pipet volume 10 ml

                                        - Buret

                                        - Pipet tetes

                                        - Corong

Bahan                            : - Sampel mi instan

                                       - HCl 3%

                                       - NaOH 3,25%

                                       - Indikator PP

                                       - Aquadest

                                       - Luff

                                       - KI 30%

                                       - H2SO4 25%

                                       - Tio 0,1 N

                                       - Indikator kanji

Cara Kerja                    : 

1. Ditimbang sampel sebanyak 3,0069 gram ke dalam erlenmeyer
2. Ditambahkan 25 ml HCl 3 %
3. Dididihkan selama 1,5 jam dengan pendingin tegak
4. Dimasukkan ke dalam labu ukur 250 ml
5. Dinetralkan dengan NaOH 3,25 % (indikator PP)
6. Dihimpitkan hingga 250 ml
7. Disaring, lalu diambil filtratnya
8. Dipipet sebanyak 10 ml (filtrat) ke dalam erlenmeyer asah
9. Ditambahkan 25 ml Luff dan 15 ml H2O
10. Dididihkan selama 10 menit dengan pendingin tegak lalu didinginkan
11. Ditambahkan KI 30% sebanyak 10 ml dan 25 ml H2SO4 25%
12. Dititrasi dengan tio 0,1 N terstandarisasi dengan indikator kanji
13. Dibandingkan terhadap blanko

Pengamatan                  :

Bobot sampel               : 3,0069 g

Volume titrasi blanko    : 44,9 ml

Volume titrasi sampel    : 13,2 ml

Perhitungan                   :

1. AT =  (B-sampel) ml x N tio standar

                      N tio standar
         =  (44,90-13,20 ) ml x 0,1000 mmol/meq
                              0,1000 mmol/meq
         = 31,7 ml
         = 3,17 x 10 ml

3,17 = 7,2 + ( 0,17 x 2,5)
        = 7,2 + (0,425)
        = 7,625
        = 7,625x 10 mg
       = 76,25 mg

2.  % =   fp x mg glukosa    x 100 %
                   mg sampel
         = 25 x 76,25 mg   x 100%
                3006,8 mg
         =  63,39 %

Kesimpulan                   :

              Berdasarkan hasil perhitungan tersebut dapat disimpulkan bahwa kadar karbohidrat dalam sampel tersebut ialah 63,39 %.

Daftar Pustaka              :

http://indhpsari.blogspot.com/2013/06/analisa-karbohidrat-glukosa-metode-luff.html

http://id.wikipedia.org/wiki/Pengawetan_makanan

                                                                                                         Makassar, 13 Desember 2013

Guru Pembimbing                                                                                       Praktikkan

(                             )                                                                           (Irene Pratami R. Naddu)